(一)清洗
由于物品清洁与否影响灭菌效果，除污物和液体外，对于实验室使用的物品应该尽量先清洗干净后灭菌，物品洗涤后，应干燥并及时包装：
(二)包装
1．包装材料应允许物品内部空气的排出和蒸汽的透人。市售普通铝饭盒与搪瓷盒，不得用于装放待灭菌的物品，应用自动启闭式或带通气孔的器具装放；
2．常用的包装材料包括全棉布、一次性无纺布、一次性复合材料(如纸塑包装)、带孔的金属或玻璃容器等。新包装材料在使用前，应先用生物指示物验证灭菌效果后方可使用。包装材料使用前应仔细检查有无残缺破损；
3．布包装层数不少于两层。用下排气式压力蒸汽灭菌器的物品包，体积不得超过30cm~30cm~25cm；用于预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器的物品包，体积不得超过30cm~30cmX 50cm。金属包的重量不宜超过～，敷料包不超过5kg；对于不符合上述要求的应该延长灭菌时间，并做好监测；
4．新棉布应洗涤去浆后再使用；反复使用的包装材料和容器，应经清洗后才可再次使用，否则因影响透气性而影响灭菌效果；
5．盘、盆、碗等器皿类物品，尽量单个包装；包装时应将盖打开；若必须多个包装在一起时，所用器皿的开口应朝向一个方向；摞放时．器皿间用吸湿毛巾或纱布隔开，以利蒸汽渗入；
6．灭菌物品能拆卸的必须拆卸，如对注射器进行包装时，管芯应抽出。必须暴露物品的各个表面(如剪刀和血管钳必须充分撑开)以利灭菌因子接触所有物体表面。有筛孔的容器，应将盖打开，开口向下或侧放；
7．物品捆扎不宜过紧。
(三)装载
1．下排气
灭菌器的装载量不得超过柜室内容量的80％；预真空
灭菌器的装载量不得超过柜室容积90％，且不得小于柜室容积的10％和5％，以防止“小装量效应”，因残留空气影响灭菌效果；
2．应尽量将同类物品放在一起灭菌，若必须将不同类物品装放在一起，则以**难达到灭菌物品所需的温度和时间为准；
3．物品装放时，上下左右相互间均应间隔一定距离以利蒸汽置换空气；大型
灭菌器，物品应放于柜室或推车上的载物架上；无载物架的中小型灭菌器，可将物品放于网篮中；
4．难于灭菌的物品放在上层，较易灭菌的物品放在下层；金属物品放下层，织物包放上层，物品装放不能贴靠门和四壁，以防吸人较多的冷凝水；
5．金属包应平放，盘、碟、碗等应处于竖立的位置；纤维织物应使折叠的方向与水平面成垂直状态；玻璃瓶等应开口向下或侧放以利蒸汽进入和空气排出；
6．启闭式筛孔容器，应将筛孔的盖打开。
(四)灭菌
1．蒸汽的质量是影响灭菌效果的主要因素，其质量应该符合要求，G外一般采用去离子水作为蒸汽的水源。必须安装气水分离器，使灭菌过程中蒸汽的饱和度合格。
2．灭菌操作程序应按
压力蒸汽灭菌器生产厂家的操作使用说明书的规定进行；灭菌一般包括排气、灭菌、干燥等过程。
3．压力蒸汽灭菌温度和时间的对应关系见表3―3。
4．灭菌物品需冷却后再从搁架上取下。
压力蒸汽灭菌所需时间（min）
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物品种类 121℃下排气 132℃脉动真空
硬物(裸露) 15 3
硬物(包裹) 20 4
织物包 30 4
液体 30 4
