物理灭菌法系指采用物理因素如温度、声波、辐射等达到灭菌目的的方法。加热可破坏微生物中的酶、蛋白质和核酸,导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好,是因为:①湿热灭菌时,有水分存在,蛋白质易变性;②湿热的穿透力比干热大;③湿热有潜热(汽化热)。
1.干热灭菌法
常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法两种。
(1)火焰灭菌法 系指用火焰直接烧灼以达到灭菌的方法。将手术刀、镊子、药刀等通过火焰几秒钟即可。
(2)干热空气灭菌法 系指利用高温干热空气达到灭菌的方法。一般需160℃~170℃维持2h以上。本法适用于玻璃器皿、搪瓷容器及油性和惰性辅料,如液体石蜡、油类、脂肪类、滑石粉、活性炭等。
2.湿热灭菌法
本法是利用饱和水蒸气或沸水进行杀灭菌的方法。
(1)热压灭菌法本法系在热压灭菌器内,利用高压饱和水蒸气杀灭微生物的方法。该法是**可靠的灭菌方法。但灭菌应以保证药物不被破坏失效为前提,所以很多药剂不宜采用热压灭菌。热压灭菌法所需的温度及与温度相当的压力和时间,见下表。
温度(℃) | 表压(kPa) | 灭菌时间(min) |
115 | 68.6 | 30 |
121.5 | 98.0 | 20 |
126.5 | 137.2 | 15 |
常用的热压灭菌器有小型的手提式热压灭菌器、大型的卧式热压灭菌器等。热压灭菌法适用于耐热药物及其水溶液、手术器械及用具等物品的灭菌。热压灭菌器使用时应注意以下问题。①检查仪表:使用前应先检查压力表、温度表、安全阀等部件。②排尽空气:饱和水蒸气灭菌效力强于湿饱和蒸汽和过热蒸汽。为保证饱和蒸汽的获得,shou先开启放气阀门将灭菌器内空气排尽,使压力与温度相符。③准确记时:一般先预热l5~20min,再升压和升温,达到预定压力和温度后开始计时。④灭菌完毕后,停止加热,待压力表指针降**零,打开放气阀,排尽器内蒸气,待温度降**40℃以下,再缓缓开启门盖。不可快速放气,骤然减压会导致容器爆裂和药液外溢。
(2)流通蒸气灭菌法和煮沸灭菌法 系指在常压下用100℃的水蒸气或用水煮沸以杀灭微生物的方法。灭菌时间一般为30~60min,可杀灭繁殖型细菌,但不一定能完全杀灭芽孢。适于含有抑菌剂药液的灭菌、1~2ml的注射剂及耐热品种的灭菌。
(3)低温间歇灭菌法 系指将待灭菌的物品先在60℃~80℃加热1h以杀死细菌繁殖体。然后再室温或孵箱保温24h,以使芽孢发育成繁殖体,再进行加热将其杀灭。如此操作三次以上,**全部灭菌。此法适于必须采用加热灭菌但又不耐高温的药品。应用本法灭菌的制剂,需添加适量的抑菌剂。
3.紫外线灭菌法
紫外灯产生紫外线,其中波长254~257nm的紫外线杀菌力**强。紫外线可使微生物核酸蛋白变性死亡,同时空气受紫外线辐射后产生微量臭氧也起灭菌作用。由于紫外线穿透能力很差,所以紫外线灭菌法仅适于表面和空气的灭菌。紫外线灭菌的适宜温度在10℃~55℃,相对湿度为45%~60%。
4.辐射灭菌法
辐射灭菌是应用γ射线杀灭细菌的方法。常用60Co辐射源放射γ射线杀菌,被灭菌物品温度仅有几度的变化,其灭菌的机理是γ射线直接作用于微生物的蛋白质、核酸和酶等,促使化学键断裂,杀死微生物;又可间接作用于微生物体内的水分子,引起水的电离和激发,生成自由基,再作用于微生物活性分子,使微生物死亡。由于γ射线穿透力极强,可用于密封和整箱已包装的药物的灭菌。灭菌效果可靠。一般认为中成药用l0千格瑞(KGY)以下剂量辐射均能达到卫生标准要求。